722紫外分光光度計作為實驗室基礎分析儀器,廣泛用于測定物質(zhì)在190–1100nm波段的吸光度,從而實現(xiàn)定量分析(如蛋白質(zhì)、核酸、重金屬絡合物等)。其操作看似簡單,但若步驟不規(guī)范,易引入誤差,影響數(shù)據(jù)可靠性。掌握
722紫外分光光度計正確使用方法,是獲得準確、可重復結果的前提。

一、使用前準備
環(huán)境要求:
置于干燥、無強光直射、無腐蝕性氣體的實驗臺,避免震動;
預熱儀器30分鐘,使光源與電子系統(tǒng)穩(wěn)定(尤其氘燈需充分預熱);
比色皿選擇:
紫外區(qū)(<400nm)必須使用石英比色皿,玻璃或塑料會強烈吸收紫外光;
可見光區(qū)可使用玻璃或光學塑料皿,但需保持透光面潔凈無劃痕;
空白校正:
用待測樣品的溶劑(如去離子水、緩沖液)作為空白,裝入匹配的比色皿;
擦凈外壁指紋與水漬,毛面朝手,光面朝光路。
二、規(guī)范測量流程
開機自檢:打開電源,確認光源正常點亮(鎢燈紅光、氘燈藍紫光);
波長設定:旋轉波長調(diào)節(jié)旋鈕至目標波長(如280nm測蛋白),數(shù)字窗口確認數(shù)值;
100%T/0Abs校準:
將空白比色皿放入樣品室,關閉蓋子;
按“100%T”或“AutoZero”鍵,使儀器基線歸零;
樣品測量:
取出空白,放入樣品比色皿,關閉蓋子;
待讀數(shù)穩(wěn)定后記錄吸光度(A)值;
若樣品濃度過高(A>1.0),應稀釋后重測,確保在線性范圍。
三、使用后維護
測量完畢,倒掉比色皿內(nèi)液體,用去離子水沖洗3次,晾干存放;
關閉光源(部分機型可單獨關氘燈以延長壽命),再關閉總電源;
定期用鏡頭紙清潔樣品室反光鏡與光窗,防止灰塵積聚;
長期不用時,放入干燥劑防潮。